基因组DNA样本是如何收集和存储的?

现代生物学研究的许多分支都需要收集完全完整的基因组DNASynthroid片200mg。基因组DNA是指生物体内的一整套DNA。在采集过程中,人们通常希望尽可能地保持DNA链的长度和完整性。基因组DNA的收集包括从血液、微生物培养物和组织等生物物质中提取DNA。两种最常用的DNA提取技术是包装试剂盒和苯酚;氯仿提取。

在显微镜下观察

基因组DNA提取之前的生物材料储存
用于提取基因组DNA的生物材料应以保存DNA完整性的方式存储。通常的公理;越冷越好。虽然通常可以从储存在不太理想条件下的生物材料中获得一些DNA,但通常很难获得完整的基因组DNA,因为有时核酸已经开始降解,基因组DNA链可能更加断裂。糟糕的存储方法会降低从这些材料获得的读长度和数据质量。用于基因组DNA提取的生物材料的最佳存储方法包括-80℃以下的冷冻存储,这应该可以阻止核酸的降解。

基因组DNA提取试剂盒
有许多试剂盒可用于基因组DNA的提取,它们可以简化过程,即使是在缺乏经验的技术人员使用时,通常也能获得高质量、可复制的结果。一般来说,这些套件以溶解所有细胞的方式分解生物材料开始。这一过程暴露了细胞核中的DNA,使其可以进一步与细胞中的非DNA物质分离。产生的液体通常悬浮在盐缓冲液中,并通过专门的过滤器旋转以收集DNA,同时冲走非DNA物质。然后DNA被沉淀,用酒精从过滤器中清洗出来。最后,将材料旋转成可悬浮在适当缓冲液中的球团。

基因组DNA苯酚:氯仿提取
从生物材料中提取基因组DNA预计是困难的,低产量的,或携带其他一些细微差别,禁止使用试剂盒,一些研究人员更喜欢使用苯酚:氯仿DNA提取方法。这种方法通常需要更有经验的技术人员,因为程序对用户错误更敏感,而且产量可能会因工作台技术的不同而变化很大。和套件一样,生物材料必须首先被破坏。然后,它悬浮在苯酚氯仿溶液中,并旋转,使物质分离成相。收集所需相,并通过多次酒精洗涤旋转,然后在-20℃下进行最后的酒精沉淀步骤。最后,将DNA制成颗粒,并在所需的缓冲液中重悬。

提取后基因组DNA的存储和处理
无论基因组DNA材料是如何收集的,正确的存储和处理对于维持高质量的DNA是至关重要的,这些DNA可用于下游研究应用。持久的多次冻融循环会降解DNA,损害从提取的基因组DNA中获取数据的能力。DNA在室温下会开始降解,需要冷冻以保持样本的完整性。如果一个特定的基因组DNA样本需要在多个实验中使用,建议制作多个等分,只在需要时解冻。短时间内使用的DNA材料可以储存在-20C。长期保存的DNA应放在超低冰柜中,通常在-80℃或以下,以防止DNA中的核酸降解。通常,现场外生物存储服务用于保护和存储材料。这就保证了备份材料的安全和监控。